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PeproTech高品質(zhì)細(xì)胞因子及蛋白生產(chǎn)商-相關(guān)技術(shù)文章

更新時(shí)間:2024-07-26      瀏覽次數(shù):205

PeproTech高品質(zhì)細(xì)胞因子及蛋白生產(chǎn)商

 

Peporech公司于1988年創(chuàng)立于美國(guó)新新澤西州,經(jīng)過(guò)26年的發(fā)展已成為世jie上zui大的重組細(xì)胞因子和蛋白、相關(guān)抗體及ELISA試劑盒。

Peporech公司是高品質(zhì)細(xì)胞因子生產(chǎn)商,產(chǎn)品包括原核和真核細(xì)胞表達(dá)的高質(zhì)量的重組蛋白,單克隆/多克隆抗體,酶聯(lián)免疫吸附開(kāi)發(fā)試劑盒,相關(guān)培養(yǎng)基等

Peporech公司已經(jīng)開(kāi)發(fā)出2000多種產(chǎn)品,其精良的技術(shù)保證了產(chǎn)品的高質(zhì)量,可靠性和穩(wěn)定性。

Peporech產(chǎn)品具有很高的性價(jià)比,在世界上眾多高水平的實(shí)驗(yàn)室和研究機(jī)構(gòu)中廣泛使用。截至2013年底,已被13000SCT文獻(xiàn)使用。

Peporech產(chǎn)品主要領(lǐng)域:

l  重組細(xì)胞因子和蛋白

l  單克隆和多克隆抗體

l  ELISA試劑盒

l  無(wú)動(dòng)物成分(Animal Free)的重組細(xì)胞因子和蛋白    

l  GMP級(jí)別的重組細(xì)胞因子和蛋白

l  人胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基

實(shí)驗(yàn)方案 - Western Transfer iBlot2 Dry Blot

1. 打開(kāi) iBlot2 設(shè)備的蓋子。

2. 使用套件 #IB23001 Thermo Fisher) 解開(kāi)頂部和底部堆棧的密封。將堆棧放在塑料托盤中。(一個(gè)托盤可以容納兩個(gè) 4-20% Tris-Gly 凝膠)

3. 將堆棧放在 iBlot2 轉(zhuǎn)印機(jī)上,確保堆棧中的電氣觸點(diǎn)與 iBlot2 系統(tǒng)左側(cè)的觸點(diǎn)對(duì)齊。

4. 小心地從包含頂部陰極部分的堆棧中取出頂部部分,并將其放在一邊。

5. 將預(yù)運(yùn)行凝膠放在轉(zhuǎn)印膜上,確保凝膠標(biāo)記物朝向您,并使用印跡輥去除所有氣泡。

6. 將預(yù)浸泡(在去離子水中)的 iBlot 濾紙放在預(yù)運(yùn)行凝膠上,并使用轉(zhuǎn)印輥去除氣泡。

7. 將陰極堆棧放在預(yù)浸泡的濾紙上,電極面朝上,凝膠面朝下。使用印跡輥去除氣泡。

8. 將吸收墊放在陰極堆棧的頂部,金屬觸點(diǎn)位于左側(cè),確保其與系統(tǒng)接觸點(diǎn)對(duì)齊。

9. 蓋上蓋子。觸摸屏幕上的 P3,然后開(kāi)始,它將運(yùn)行 7 分鐘。

10. 一旦 iBlot2 發(fā)出嗶嗶聲,表示循環(huán)完成,請(qǐng)打開(kāi) iBlot2 設(shè)備的蓋子。

11. 丟棄一次性海綿和陰極堆棧。

12. 小心地取下并丟棄濾紙。使用凝膠作為標(biāo)記,并使用剃須刀將轉(zhuǎn)移膜切成兩半。

13. 丟棄凝膠并從堆棧中取出轉(zhuǎn)印膜。取下膜進(jìn)行測(cè)試后,丟棄陽(yáng)極堆棧。

14. 將膜在封閉溶液(所有抗體為 10% Seablock)中孵育 40 分鐘,在軌道振蕩器上輕輕攪拌。

15.在軌道振蕩器上的干凈托盤中用TBSTTBS,pH 7.2,0.1%TWEEN-20)洗滌膜三次;每次洗滌持續(xù) 5-10 分鐘。

16.TBST中的探測(cè)(一)抗體稀釋至50ml的體積(約0.20μg/ml),并在室溫下將膜在抗體溶液中孵育1-4小時(shí)。(最佳孵育時(shí)間取決于抗體/抗原結(jié)合親和力,并且必須預(yù)先確定每種抗體。

17. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。

18. 根據(jù)制造商的規(guī)格稀釋 TBST 中的二抗。將膜在含有 50ml 稀釋二抗的干凈托盤中在室溫下在軌道振蕩器上孵育一小時(shí)。

19. 按照步驟 #15 洗滌膜三次。

20. 顯色需要使用市售的(例如 Bio-Rad Sigma)堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒。請(qǐng)按照制造商的說(shuō)明進(jìn)行操作。

21. 條帶變得清晰可見(jiàn)后,將膜放入裝有 diH2O 的托盤中至少 10 分鐘,以停止顏色。

推薦材料:

SDS-PAGE 儀器及配件

iBlot2 干轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)系統(tǒng)

iBlot2 NC 常規(guī)膜組

Seablock

1xTBST

抗原特異性探測(cè)抗體(一抗)

二抗(與堿性磷酸酶偶聯(lián)的驢抗探測(cè)抗體種類)

市售堿性磷酸酶偶聯(lián)底物試劑盒

 

以下是Peporech公司熱銷產(chǎn)品:

產(chǎn)品名稱

貨號(hào)

規(guī)格

Human EGF

AF-100-15-100

100ug

Human IL-4

200-04-20

20ug

Human TNF-alpha

300-01A-10

10ug

Human FGF-basic

100-18B-50

50ug

Human IFN-gamma

300-02-100

100ug

Human IL-1alpha

200-01A-10

10ug

Murine GM-CSF

315-03-20

20ug

Human FGF-basic

100-18B-10

10ug

Murine M-CSF

315-02-10

10ug

Human GM-CSF

300-03-20

20ug

Murine IL-4

214-14-20

20ug

Human TNF-alpha

300-01A-50

50ug

Human TGF-β1 (HEK293 derived)

100-21-10

10ug

Murine IL-4

214-14-5

5ug

Human IFN-gamma

300-02-20

20ug

Human IL-2

200-02-50

50ug

Human TGF-β1 (HEK293 derived)

100-21-2

2ug

Human IL-2

200-02-10

10ug

Human IL-1beta

200-01B-10

10ug

Human IL-4

200-04-5

5ug

Human VEGF

100-20-10

10ug

Human IL-6

200-06-20

20ug

Murine GM-CSF

315-03-5

5ug

Murine IFN-gamma

315-05-20

20ug

Human EGF

AF-100-15-500

500ug

Human IL-6

200-06-5

5ug

Human IL-15

200-15-10

10ug

Human GM-CSF

300-03-5

5ug

Murine sRANK-Ligand

315-11-10

10ug

Human EGF

AF-100-15-1000

1000ug

Human HGF

100-39-10

10ug

Murine SCF

250-03-10

10ug

Murine EGF

315-09-100

100ug

Murine IL-6

216-16-10

10ug

Human IL-1beta

200-01B-2

2ug

Human SCF

300-07-10

10ug

Murine IL-3

213-13-10

10ug

Human M-CSF

300-25-10

10ug

Human VEGF

100-20-2

2ug

Human TGF-beta1-Produced in CHO

100-21C-10

10ug

Murine TNF-alpha

315-01A-5

5ug

Murine TNF-alpha

315-01A-20

20ug

Murine IL-2

212-12-20

20ug

Human IL-7

200-07-10

10ug

Murine WNT-3A

315-20-10

10ug

Human IL-21

200-21-10

10ug

Human FGF-basic

100-18B-100

100ug

Human IGF-I

100-11-100

100ug

Murine IL-2

212-12-5

5ug

Human/Murine/Rat BMP-2

120-02-10

10ug

 


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